Mouse models in the study of malignant melanoma
Amaya Virós Usandizaga · TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) · 2013
Presentamos tres publicaciones que resumen la investigacion de la propuesta doctoral en modelos de melanoma en raton. En la primera publicacion presentamos como la expresion del oncogen V600EBRAF en melanocitos de raton adultos combinado con la expresion en queratinocitos adultos del mismo raton de KITL logra traslocar los melanocitos de la dermis a la epidermis de los ratones. Sin embargo, la inclusion de melanocitos epidermicos no logra generar un melanoma en el raton que replique las caracteristicas primordiales del melanoma en humanos. Los tumores en el raton siguen siendo principalmente de ubicacion dermica, sin componente epidermico, y no presenta una fase de crecimiento radial. Los tumores en el modelo V600EBRAF-KITL son muy invasivos y presentan destruccion local en la dermis, similares a los melanomas que surgen en el modelo V600EBRAF. Lo que si ocurre con el modelo de raton V600EBRAF-KITL es que en la epidermis normal vemos el deposito de melanocitos en la epidermis interfolicular, algo no observado en ratones normales o ratones V600EBRAF. Igualmente, los nevus dermicos que se forman tienen un fenotipo distinto, con mayor numero de celulas en la dermis papilar. Otro de los hallazgos importantes es que los melanomas que surgen en este modelo de raton surgen en mayor numero (mayor penetrancia) y con una latencia mas corta que los melanomas en el modelo tradicional V600EBRAF. Nuestro segundo estudio investiga la aparicion de los carcinomas escamosos y los queratoacantomas (cSCC y KA) que surgen en 25% de pacientes como efecto secundario a los nuevos farmacos inhibidores del oncogen BRAF. Estos farmacos se han demostrado eficaces en el tratamiento del melanoma maligno metastatico, prolongando la supervivencia de pacientes. En nuestro estudio, utilizamos un modelo de raton de carcinogenesis de escamosos cutaneos para demostrar como la utilizacion de inhibidores de BRAF es capaz de acelerar la progresion tumoral en estos pacientes. Nuestra hipotesis es que la activacion del oncogen RAS en queratinocitos puede interaccionar con inhibidores de BRAF para promover la proliferacion celular, que llevaria al desarrollo de KA y cSCC en los pacientes. Nosotros demostramos evidencia indirecta que el mecanismo que subyace el desarrollo de tumores de estirpe queratinocitica en estos pacientes es la activacion paradojica de la via de proliferacion celular MAP Kinase tanto en ratones como humanos. Los inhibidores de BRAF inhiben la via MAP Kinase en celulas que portan una mutacion BRAF, pero paradojicamente son capaces de inducir una activacion de la misma via en celulas que en lugar de mutacion en BRAF tienen mutacion en RAS. Nuestros resultados sugieren que las mutaciones en queratosis actinicas (lesiones premalignas precursoras de KA y cSCC) proliferan cuando los pacientes inician tratamiento con inhibidores de BRAF para su melanoma metastatico. En nuestro tercer estudio demostramos como las lesiones inducidas por inhibidores de BRAF son altamente proliferativas y responden al antimetabolito 5-Fluorouracilo aprobado para el uso de lesiones queratinociticas cutaneas premalignas. Nuestro modelo de raton en este articulo nos permite desarrollar una nueva guia para el tratamiento de pacientes en estadios avanzados de melanoma metastatico BRAF. Demostramos como la inhibicion de MEK, una quinasa que senaliza en las ultimas fases de activacion de la via MAP Kinase, es capaz de evitar el desarrollo de lesiones cutaneas, evitando la activacion paradojica de MAP Kinase.